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免疫层析如何选择合适的荧光微球?

更新:2019-11-28  编辑:madenew  已被访问:715次

目前,市场上的荧光微球有很多种,根据荧光物质的不同,可以分为时间分辨荧光微球、普通荧光微球(黄色荧光微球、红色荧光微球)等;根据荧光微球制备工艺的不同,可以分为荧光染料包裹微球、染色荧光微球、荧光染料分子交联在微球表面的荧光微球等;根据荧光微球大小可以分为1微米级以上、0.1-1微米级之间、0.1微米级以下等级别。

       选择适合的荧光微球进行荧光定量层析,需要考虑以下几个方面:

       1)、荧光微球性噪比高,因为只有微球的荧光放大效应高,才能使定量层析试条的灵敏度高(微球越大,灵敏度越高),时间分辨荧光微球相对于普通荧光微球来说,灵敏度更高。

       2)、荧光稳定,这个需要从几个方面来讨论:

       ①   微球中荧光染料不能够在微球加工、处理过程中泄露。

       ②   荧光微球悬浮在PH4-10之间的溶液中,微球的荧光强度不会发生变化。

       ③   微球在水溶液中长期放置,荧光强度不会随着时间的延长而下降。

       3)微球的均一性。对于层析试条来说,NC膜的孔径并不是均一的,如果微球不均匀,那就会导致微球在膜上流动性不均一,从而导致试条的检测结果精密度差。

       4)微球大小,根据目前市面上常用的NC膜的孔径大小,荧光微球的最佳大小在100nm-500nm之间,微球太小,单个微球包裹的荧光染料不多,从而导致信噪比不高。微球太大,微球在NC膜上的流动速度会非常慢。试条背景荧光高,试条检测时间长。因此在100nm-500nm之间,其中最优是在200nm-300nm左右。

       美牛生物自主开发的荧光微球完全能够满足上面的应用要求。单个微球的荧光强度非常高,荧光非常稳定,微球PDI系数可以控制在0.05以下,同时荧光微球的每批生产量可以达到5L左右。批间荧光强度一致性好,批间微球平均粒径可以控制在20nm以内。

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